Микроскопический метод диагностики онихомикозов.
Заказать уникальную дипломную работу- 3737 страниц
- 41 + 41 источник
- Добавлена 28.05.2019
- Содержание
- Часть работы
- Список литературы
- Вопросы/Ответы
Глава 1. Общие теоретические положения 5
1.1 Характеристика основных возбудителей охниомикозов 5
1.2 Охниомикозы 12
Глава 2. Методы и материалы. 20
2.1 Лабораторная диагностика охниомикозов 20
2.2 Протокол исследования и анализ полученных данных. 23
Заключение 29
Выводы 30
Список литературы 32
Приложения 37
Детекция результатов (продуктов ПЦР) посредством электрофореза в агарозном геле. Для этого агарозный гель с образцами ДНК окрашивается этидием бромидом, который при взаимодействии с ДНК обеспечивает е свечение в УФ-лучах.При наличии в образцах фрагментов, специфичных к используемым праймерам, эти образцы становятся видимыми в ультрафиолете, что говорит о положительной реакции.Преимуществом метода ПЦР является высокая чувствительность (1000 копий фрагментов ДНК на 1 мл) данного исследования, его высокая точность и относительная высокая скорость получения точных результатов [5, 40]. 2.2 Протокол исследования и анализ полученных данныхИсследование проводилось на базе ________________________В рамках работы были исследованы 30 человек с диагнозом онихомикоз ногтей стоп. Среди больных были как мужчины, так и женщины. Возраст пациентов составлял от 20 до 70 лет.Основные методы исследования:-сбор информации о пациенте, в частности, уточнение возраста, пола, продолжительности заболевания;-лабораторные исследования: микроскопический и культуральный методы анализа.После опроса пациента проводился забор материала для исследования. Для этого делали визуальный осмотр пораженных участков, затем определяли тип онихомикоза и делали соскоб в соответствие с методикой, представленной в разделе 2.1.Взятый материал подвергали микроскопическому и культуральному исследованию (методики представлены в разделе 2.1), на основании результатов которых проводили идентификацию возбудителей. За период прохождения преддипломной практики в медицинское учреждение с проблемой онихомикозов обратилось порядка 100 человек.Материалы и оборудование:При выполнении исследований использовали следующее оборудование:весы лабораторные ВЛК-500М, ГОСТ 19491-73;дистиллятор БВЭ-2М, ТУ 25-11-911-73;стерилизатор паровой ВК-75, Россия;шкаф сухожаровый ШСС-80п, Россия;термостат ТС-80-М-2 (Россия) ТУ 25-05-3749-77холодильник бытовой «Атлант», Белоруссия;плитка электрическая, ГОСТ 14949-83Ешкаф вытяжной ШВ-2А-НЖ;микроскоп «Микмед-1», Россия;лабораторная посуда (мерные цилиндры, колбы на 100, 500 и 1000 см3), ГОСТ 1770-74Е;пробирки биологические, ГОСТ 1770-74Е;пипетки стеклянные градуированные объемом 1,0; 5,0; 10,0 см3 ГОСТ 2092-84;чашки Петри с крышками, ГОСТ 25366-82Е;цифровой фотоаппарат;компьютер персональныйпокровные и предметные стекла для микроскопирования;Полученные результаты исследованияПоловозрастные характеристики пациентов и типы поражения ногтей стоп онихомикозом у обследованных больных представлены в таблице 2. Таблица 2. Характеристика типов онихомикоза у обследуемых пациентовТип онихомикозаМужчиныЖенщины20-40 лет41-50 лет51-70 лет20-40 лет41-50 лет51-70 летПоверхностный 124035Дистально-латеральный подногтевой013124Проксимальный подногтевой001012Анализируя данные таблицы можно сделать вывод, что с возрастом частота встречаемости грибковых поражений ногтей повышается (рис. 10).Рисунок 10. Частота встречаемости различных типов онихомикоза в разном возрастеПри чем, наиболее часто встречается поверхностный тип онихомикоза – он встречается у 15 пациентов (50 % всех исследуемых), дистально-латеральный подногтевой тип встречается у 11 пациентов (36,7 %), проксимальный подногтевой тип онихомикоза был диагностирован у 4 пациентов (13,3 %).Идентификацию возбудителей проводили по следующей схеме, представленной на рисунке. 11 [41]. Рисунок 11. Схема лабораторной диагностики возбудителей онихомикозаВ таблице 3 показаны варианты назначаемой терапии при всех возможных полученных результатах.Таблица 3. Результаты лабораторных исследований онихомикоза и назначаемая терапияПри микроскопическом и культуральном методах исследования были получены следующие результаты, представленные в таблице 4.Таблица 4. Основные возбудители онихомикозов, выделенные у обследованных пациентовТип онихомикозаВыявленные возбудителиЧисло пациентов, у которых был обнаружен данный вид грибка (%)ПоверхностныйТ. mentagrophytes var. interdigitale15 (50 %)Дистально-латеральный подногтевойТ. rubrum 11 (36,7 %)Scopulanopsis brevicaulis2 (6,7 %)Candida albicans1 (3,3 %)Проксимальный подногтевойCandida albicans 3 (9,9 %)Т. rubrum1 (3,3 %)Scytalidium spp1 (3,3 %)Таким образом, наиболее часто встречающимся грибком был Т. mentagrophytes var. Interdigitale(50 %), так же достаточно часто встречался Т. rubrum(13,2 %).Остальныевиды грибков встречались в единичных случаях. Плесневелых грибов обнаружено не было.Рисунок 12. Анализ частоты встречаемости возбудителей онихомикозовТаким образом, проведенные лабораторные исследования по идентификации возбудителей онихомикозов показали возможность видовой идентификации средствами микроскопических и культуральных методов. Кроме того данные методы обеспечивают возможность определения смешанных инфекций а также опровержения грибковых инфекций в случае когда при микроскопии не выявлен гриб с типичной морфологией и на чашках Петри с питательной средой Сабуро рост не наблюдается.ЗаключениеДанная дипломная работа состоит из введения, двух глав, заключения и списка использованной литературы. В первой главе описаны теоретические аспекты онихомикозов, этиологии, основных принципов диагностики, патогенеза и форм болезни. Во второй главе представлены результаты проведенного нами исследования пациентов с онихомикозами стоп.В рамках данной работы показано практическое значение микроскопии соскобов с пораженных ногтевых пластин в диагностике онихомикозов. Микроскопический анализ преследует две основные цели: во-первых, выявление этиологии заболевания, и во-вторых, идентификация возбудителя до рода, иногда до вида. Преимуществами микроскопического анализа на практике являются быстрота его проведения, минимальные затраты на расходные материалы и возможность идентификации возбудителей по тинкториальным свойствам.Выводы1. Онихомикоз – это распространенное грибковое поражение ногтевой пластины и ногтевого ложе, вызываемый различными возбудителями грибковой природы. 2. На первом месте по частоте встречаемости находится гриб рода Trichophytonrubrum и составляет в более 75 % случаев грибкового поражения ногтей. В 15 % случаев гриб Trichophytonmentagrophytesvar interdigitale. На втором месте по встречаемости находятся дрожжеподобные грибы, в частности, грибы рода Candida, они по разным данным встречаются в 5 -10 % случаев. Среди плесневелых грибов наиболее часто встречаются грибы рода Epidermophytonfloccosum (5 %) Trichophytonviolaceum и Trichophytontonsurans (1 % вместе).3. Различают несколько типов онихомикозов. Наиболее распространенный тип онихомикоза –дистально-латеральный подногтевой. Все патологические процессы, связанные с развитием грибка происхоят не в самой ногтевой пластинке, а под ней, в самом ложе ногтя. Чаще всего такой тип онихомикоза вызывает Т. rubrum. Поверхностный тип поражения вызывается чаще всего дерматофитным грибком Trichophyton mentagrophytes var. interdigitale. Данная форма онихомикоза характеризуется поражением самой ногтевой пластинки, причем поражение начинается с поверхности ногтя и проникает все глубже. Проксимальный тин онихомикоза характеризуется попаданием патогена под проксимальный валик и дальнейшим проникновением его под ногтевую пластинку, с дальнейшими дистрофическими изменениями. Такой тип онихомикоза вызывается дерматофитным грибком Т. rubrum4. К лабораторным методам диагностики относятся микроскопический анализ, культуральный метод, метод ПЦР. Преимуществами микроскопического анализа на практике являются быстрота его проведения, минимальные затраты на расходные материалы и возможность идентификации возбудителей по тинкториальным свойствам. Культуральный метод, сравнению с микроскопическим более точен и информативен, однако его минусом является длительность проведения анализа, значительные материальные затраты на расходные материалы. Метод ПЦР, по сравнению с микроскопическим и культуральными методами, дает точный ответ: относится ли возбудитель к конкретному виду, или нет. Минусом данного метода по сравнению с остальными является то, что требуются предварительные исследования посредством вышеперечисленных методов для примерного определения таксономического положения патогена. ПЦР может либо подтвердить предполагаемый результат, либо его опровергнуть.5. Проведенные на базе клинической лаборатории исследования показали, что наиболее часто встречается поверхностный тип онихомикоза – он встречается у 15 пациентов (50 % всех исследуемых), дистально-латеральный подногтевой тип встречается у 11 пациентов (36,7 %), проксимальный подногтевой тип онихомикоза был диагностирован у 4 пациентов (13,3 %). Наиболее часто встречающимся грибком был Т. mentagrophytes var. Interdigitale (50 %), так же достаточно часто встречался Т. rubrum(13,2 %).Остальныевиды грибков встречались в единичных случаях. Плесневелых грибов обнаружено не было.Список литературы
2. Бурова С. А., Привольнев В. В. Онихомикозы: взгляд дерматолога и хирурга //Раны и раневые инфекции. Журнал имени профессора БМ Костючёнка. – 2015. – №. 2.
3. Сологова С. С., Панченко А. В. ОНИХОМИКОЗЫ. ТРУДНОСТИ МЕТОДИКИ ЛЕЧЕНИЯ, ПРИЧИНЫ НЕУДАЧНОГО ЛЕЧЕНИЯ (ОБЗОР) //Главный врач Юга России. – 2016. – №. 3 (50).
4. Ахмедов Ш. К. и др. СОВРЕМЕННАЯ ОЦЕНКА ЭТИОЛОГИИ, ПАТОГЕНЕЗА, КЛИНИЧЕСКОГО ТЕЧЕНИЯ ОНИХОМИКОЗОВ В ВЫБОРЕ РАЦИОНАЛЬНОЙ И ЭФФЕКТИВНОЙ ТЕРАПИИ //www. issledo. ru Редакционная коллегия. – 2019. – С. 68.
5. Саркисян Э. Ю. ТРАВМА НОГТЕЙ: ЕЩЕ ОДНА ИЗ ПРИЧИН ОНИХОМИКОЗА //Успехи медицинской микологии. – 2016. – Т. 15. – С. 167-168.
6. Сергеев Ю. В. и др. Аморолфин и современная практика лечения онихомикозов //Иммунопатология, аллергология, инфектология. – 2016. – №. 1. – С. 84-94.
7. Корсунская И. М., Панченко А. В. ВЛИЯНИЕ ОНИХОМИКОЗА НА ТЕЧЕНИЕ СОПУТСТВУЮЩИХ ЗАБОЛЕВАНИЙ У ЛИЦ СТАРШЕГО ВОЗРАСТА. ПУТИ РЕШЕНИЯ ПРОБЛЕМЫ //Главный врач Юга России. – 2018. – №. 3 (62).
8. Корнишева В. Г. ОНИХОСКОПИЯ В ДИАГНОСТИКЕ ОНИХОМИКОЗОВ //Успехи медицинской микологии. – 2017. – Т. 17. – №. 17. – С. 60-63.
9. Пчелин И. М. и др. ГЕНЕТИЧЕСКИЙ ПОЛИМОРФИЗМ СЕРИЙНЫХ ИЗОЛЯТОВ ГРИБА TRICHOPHYTONRUBRUM (CASTELLANI)-ВОЗБУДИТЕЛЯ ОНИХОМИКОЗА И МИКОЗА СТОП //Проблемы медицинской микологии. – 2018. – Т. 20. – №. 2. – С. 35-39.
10. Глушко Н.И. Грибковые ассоциации при онихомикозах / Н.И. Глушко, С.А Лисовская, В.Р. Паршаков, Н.Ю. Низамова и др. // Успехи медицинской микологии. – М.: 2006. – №3. – С. 60 – 62.
11. Котрехова Л.П. Особенности течения микозов кожи на современном этапе и их рациональная терапия / Л.П. Котрехова, К.И. Разнатовский, А.А. Вашкевич // Consilium medicum. - №1. – 2014. С. 31 – 34
12. Кубанова А.А. Руководство по практической микологии / А.А. Кубанова, Н.С. Потекаев, Н.Н. Потекаев // М., 2001. – С.189. 121 42. Кубонова А.А. Дифференциальная диагностика и лечение кожных и венерических болезней/ А.А., Кубонова, В.Г. Акимов // Атлассправочник. – М.: ООО Медицинское информационное агентство. – 2009 – С. 304
13. Потекаев Н.Н. Современные представления об этиологии, патогенезе, клиники и терапии онихомикоза / Н.Н. Потекаев, Н.С. Потекаев // Consilium medicum. – 2001 – C. 3 – 5.
14. Потекаев Н.Н. Онихомикоз // Российский медицинский журнал – 2001. – №3 – 4. – С. 138-141.
15. Сергеев А.Ю. Грибковые инфекции. Руководство для врачей / А.Ю. Сергеев, Ю.В. Сергеев – М.: Издательство БИНОМ – 2008 – №2. – С. 480
16. Сергеев А.Ю. Онихомикозы: на пути к решению проблемы / А.Ю. Сергеев, Ю.В. Сергеев // Consilium medicum, – 2003. – №3. С. 128– 136.
17. Степанова Ж.В. Грибковые заболевания стоп // Леч. врач. 2003, – №9, С. 3 – 6
18. Тлиш М. М., Кузнецова Т. Г., Псавок Ф. А. Этиологические особенности онихомикоза в Краснодарском крае. Выбор метода системной терапии //Вестник дерматологии и венерологии. – 2016. – №. 5. – С. 84-89.
19. Терещенко А.В. Совершенствование критериев рациональной терапии онихомикозов // Автореф. Дис…. канд. мед. наук. – М. – 2005
20. Халдин А.А. Клинико–этиологическая эффективность 1% спрея Ламизил при лечении грибковых поражений крупных складок кожи / А.А. Халдин, А.А. Цыкин, И.М. Изюмова // Росcийский журнал кожных и венерических болезней. – 2007.–№ 1.– С. 56–61.
21. Цыкин А.А. Онихомикоз: этиология, диагностика, клиника и лечение / А.А. Цыкин, К.М. Ломоносов // Русский медицинский журнал. – 2007. - №19. – С. 371-376.
22. Adachi M, Watanabe S. Evaluation of combined deactivators – supplemented agar medium (CDSAM) for recovery of dermatophytes from patients with tinea pedis // Med Mycol. – 2007 –Vol. – Vol.45 – P. 9.
23. Arca E., Saracli M.A.,Akar A., Yildiran S. T., Kurumlu Z., Gur A. R. Polymerase chain reaction in the diagnosis of onychomycosis // Eur. J. Dermatol. – 2004. - № 14. - P. 52 - 55.
24. Bernhardt M. Onychomycosis. Skinmed. – 2015, - May-Jun; 13 (3): 240.
25. Bokhari M.A., Hussain I., Jahangir M., Haroon T.S., Aman S., Khurshid K. Onychomycosis in Lahore, Pakistan // Ind. J. Dermatol. - 1999. - Vol. 38, №8. - P. 591-595.
26. Denning D.W., Evans E.G.V., Kibbler C.C., Richardson M.D., Roberts M.M., Rogers T.R.,Warnock D.W., and Warren R.E. Fungal nail disease: a guide to good practice (report of a Working Group of the British Society for Medical Mycology) // Br. Med.J. - 1998. - Vol. 311. - P.1277 - 1281.
27. Новоселов В.С. Онихомикозы: состояние проблемы и принципы современной терапии / В.С. Новоселов, Л.Р. Плиева, А.А. Фадеев // Русcкий медицинский журнал Дерматология. – 2004. – Том 12, №4. – С.168 – 171.
28. Перламутров Ю.Н. Микоз стоп, современные аспекты клиникоэпидемиологических характеристик и лечение / Ю.Н. Перламутров, К.Б. Ольховская // Consilium medicum. – 2012. - № 2. – С. 22 – 2.
29. Сергеев А.Ю. Кандидоз. Природа инфекции, механизмы агрессии и защиты, лабораторная диагностика, клиника и лечение / А.Ю. Сергеев, Ю.В. Сергеев. – М.: Триада-Х, 2001. – С. 472.
30. Сергеев А.Ю. Генодиагностика и новый взгляд на этиологию онихомикозов / А.Ю. Сергеев, Н.Е. Жарикова, В.Ю. Сергеев, С.Н. Щербо, Г.Н. Макова, Ю.В. Сергеев, В.Е. Маликов // Проблемы медицинской микологии. 2006 – Т.8. №2 – С. 83 – 84.
31. Сергеев А.Ю. Исследование современной этиологии онихомикоза в России / А.Ю. Сергеев, О.Л. Иванов, Ю.В. Сергеев // Российский журнал кожных и венерических болезней. – 2002. – №5. С.42 – 46.
32. Purim K.S., C. F. Feet dermatophytosis in soccer players // An. Bras. Dermatol. - 2009. - Vol. 84. - P. 2.
33. Scher RK, Baran R. Onychomycosis in clinical practice: factors contributing to recurrence. // Br. J. Dermatol. 2003; 149 (suppl 65): 5–9
34. Summerbell R.C., Cooper E., Bunn U. and Jamieson F. Onychomycosis: acritical study of techniques and criteria for confirming the etiologic significance of non dermatophytes. //Med. Mycol. -2005.-Vol. 43. - P.39 -59.
35. Васенова В. Ю., Бутов Ю. С. Современные возможности терапии онихомикозов //ДЕРМАТОЛОГИЯ. – 2016. – С. 623.
36. Соколова Т. В. и др. Дерматофитии стоп: классификация, патогенез и клиника (обзор литературы) //Микология сегодня/под ред. ЮТ Дьякова, АЮ Сергеева. – 2016. – Т. 3. – С. 139-159.
37. Ахмедов Ш. К. и др. СОВРЕМЕННАЯ ОЦЕНКА ЭТИОЛОГИИ, ПАТОГЕНЕЗА, КЛИНИЧЕСКОГО ТЕЧЕНИЯ ОНИХОМИКОЗОВ В ВЫБОРЕ РАЦИОНАЛЬНОЙ И ЭФФЕКТИВНОЙ ТЕРАПИИ //www. issledo. ru Редакционная коллегия. – 2019. – С. 68.
38. Николаевский В. О., Хватов Б. И. Современные представления о микозах стоп //Успехи медицинской микологии. – 2016. – Т. 15. – С. 160-164.
39. Соколова Т. В. и др. Дерматофитии стоп: классификация, патогенез и клиника (обзор литературы) //Микология сегодня/под ред. ЮТ Дьякова, АЮ Сергеева. – 2016. – Т. 3. – С. 139-159.
40. Корнишева В. Г. ОНИХОСКОПИЯ В ДИАГНОСТИКЕ ОНИХОМИКОЗОВ //Успехи медицинской микологии. – 2017. – Т. 17. – №. 17. – С. 60-63.
41. Сергеев А. Ю. Этиология онихомикозов и принципы оценки данных лабораторной диагностики //Иммунопатология, аллергология, инфектология. – 2001. – №. 2. – С. 79-85
Вопрос-ответ:
Какие основные возбудители вызывают онихомикозы?
Онихомикозы вызываются грибами, преимущественно родами Trichophyton, Candida и Epidermophyton.
Какие методы используются для лабораторной диагностики онихомикозов?
Для лабораторной диагностики онихомикозов применяются микроскопические методы, такие как микроскопирование препаратов и флюоресцентное окрашивание, а также молекулярно-генетические методы, включая полимеразную цепную реакцию (ПЦР).
Как проводится детекция результатов продуктов ПЦР?
Для детекции результатов продуктов ПЦР используется метод электрофореза в агарозном геле. Агарозный гель с образцами ДНК окрашивается этидием бромидом.
В какой главе статьи рассматриваются общие теоретические положения онихомикозов?
Общие теоретические положения онихомикозов рассматриваются в третьей главе статьи, которая называется "Микроскопический метод диагностики онихомикозов".
Какие выводы могут быть сделаны по результатам исследования и анализа данных?
Выводы, которые могут быть сделаны по результатам исследования и анализа данных, указаны в главе "Выводы".
Какие методы используют для диагностики онихомикозов?
Для диагностики онихомикозов используют микроскопический метод и лабораторную диагностику.
Что такое онихомикозы?
Онихомикозы - это грибковые инфекции ногтей, вызванные различными возбудителями.
Какие возбудители вызывают онихомикозы?
Онихомикозы могут вызывать различные возбудители, такие как дерматофиты, дрожжеподобные грибы и плесневые грибы.
Как происходит лабораторная диагностика онихомикозов?
Лабораторная диагностика онихомикозов включает в себя проведение микроскопического исследования, а также методы ПЦР и анализ полученных данных.
Как детектируют результаты продуктов ПЦР?
Для детекции результатов продуктов ПЦР используется электрофорез в агарозном геле, на котором образцы ДНК окрашиваются этидием бромидом.
Какие методы применяются для диагностики онихомикозов?
Для диагностики онихомикозов применяются лабораторные методы, такие как микроскопический метод, культуральное исследование, методы ПЦР и др.